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轉(zhuǎn)染都有哪些途徑可以實(shí)現(xiàn)?

更新時(shí)間:2023-02-27      點(diǎn)擊次數(shù):2852

超聲波與電磁波相似,可被反射、折射和聚焦,其不同之處在于:者傳播時(shí)需要彈性介質(zhì),而后者則可在真空中自由傳播。在固體介質(zhì)中超聲波的縱向波和橫向波均可傳播,而在氣體和液體介質(zhì)中只有縱向波可傳播。紡織品染整加工一般為液液、液固相體系,因此對(duì)超聲波縱向波的研究更為重要。

  轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù),它是研究基因表達(dá)調(diào)控,突變分析等的常規(guī)工具。細(xì)胞轉(zhuǎn)染分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,存在于游離的載體上,不整合到細(xì)胞的染色體上。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指DNA整合到宿主細(xì)胞的染色體中。
  轉(zhuǎn)染途徑:
  1.電穿孔法:
  電穿孔靠脈沖電流在細(xì)胞膜上打孔而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。本法需用特殊設(shè)置(電穿孔儀),把懸浮狀態(tài)的受體細(xì)胞和供體DNA共同放入皿中(或杯中),再施以高壓電脈沖,能夠促進(jìn)DNA通過細(xì)胞膜而進(jìn)入胞內(nèi),并可整合到細(xì)胞的DNA中,使細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。若轉(zhuǎn)移的DNA為帶有選擇標(biāo)記基因的質(zhì)粒,也可在選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行鑒定。

  2.顯微注射
  本法是借助顯微注射器直接把DNA注射入核內(nèi),使之發(fā)生整合入受體細(xì)胞基因組中的技術(shù)。本技術(shù)需要有嚴(yán)密無菌的凈化室,以免敞開操作污染,同時(shí)要能有自動(dòng)拉針儀以制備顯微針,一般用手動(dòng)拉針器拉制時(shí)要能使針末端有一個(gè)0.6cm長的細(xì)部,太長易折斷,針尖開口為2-3μm間,針口小于1μm更佳,針尖開口大于5μm易刺傷細(xì)胞。

  3.基因槍
  基因槍依靠攜帶了核酸的高速粒子而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。可以將大分子導(dǎo)入細(xì)胞。



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